一、無菌室的使用
1、無菌室應(yīng)保持清潔整齊，室內(nèi)僅存放必須的實(shí)驗(yàn)用具如酒精燈、酒精棉、打火機(jī)、
鑷子、接種針、接種環(huán)、記號(hào)筆等。不要放與檢測(cè)無關(guān)的物品。
2、用75%酒精擦拭工作臺(tái)、門、窗、桌、椅及地面，然后用75%酒精噴霧消毒空氣，最
后臭氧殺菌1小時(shí)。
3、定期檢查室內(nèi)空氣無菌狀況，細(xì)菌數(shù)應(yīng)控制在10個(gè)以下，發(fā)現(xiàn)不符合要求時(shí)，應(yīng)立
即徹底消毒滅菌。
4、無菌室殺菌前，應(yīng)將所有物品置于操作之部位（待檢物例外），然后打開紫外燈殺
菌30分鐘，時(shí)間一到，關(guān)閉紫外燈待用。
5、進(jìn)入無菌室前，必須于緩沖間更換工作服、工作鞋。
6、操作應(yīng)嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)定進(jìn)行，操作中少說話不喧嘩，以保持環(huán)境的無菌狀態(tài)。
7、火焰滅菌： 接種針、接種環(huán)等可直接火焰滅菌。
8、一 般消毒:無菌室內(nèi)的凳、工作臺(tái)、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進(jìn)行
滅菌，必須用其他方法進(jìn)行消毒處理，采用75%酒精擦拭消毒，工作人員的手也用此法
進(jìn)行消毒。

二、無菌室的準(zhǔn)備工作及要求
1、實(shí)驗(yàn)用的有關(guān)器材， 搬入無菌室前必須分別進(jìn)行滅菌消毒。
2、操作人員必須將手清洗消毒，穿戴好白大褂和鞋，才能進(jìn)入無菌室。
4、進(jìn)入無菌室后再一次消毒手部，戴上口罩然后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。

三、無菌室操作過程注意事項(xiàng)
1、玻璃器皿也應(yīng)輕取輕放，以免破損污染環(huán)境。
2、操作應(yīng)在近火焰區(qū)進(jìn)行，以免染菌。
3、接種環(huán)、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒，灼燒時(shí)先通過內(nèi)焰，使殘物烘干后再
灼燒滅菌。
4、使用吸管時(shí)，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必須用洗耳球操作。
5、觀察平板時(shí)不好開蓋，如欲沾取菌落檢查時(shí)，必需靠近火焰區(qū)操作，平皿蓋也不能大
開，而是上下蓋適當(dāng)開縫。
6、工作結(jié)束，收拾好工作臺(tái)上的樣品及器材，不要的廢品帶出無菌室，zui后用消毒液擦
拭工作臺(tái)。

四、無菌室管理規(guī)定
1、無菌室地面、臺(tái)面、其它表面每3日擦拭1次。操作臺(tái)每日用75%酒精擦拭消毒，每
次使用前準(zhǔn)備好物品紫外滅菌30分鐘后方可使用。
2、從室外帶入無菌室內(nèi)的所有物品表面要用75%酒精或紫外照射預(yù)先消毒。無菌操作前
75%酒精消毒手掌、手背。整個(gè)操作嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。
3、無菌室內(nèi)定期消毒滅菌：無菌室內(nèi)地面拖干凈并噴霧消毒。每三天一次。
4、無菌室內(nèi)無菌狀況定期檢測(cè)：滅菌后的接種室內(nèi)桌上和桌下各放一套培養(yǎng)基平皿，
暴露15分鐘，蓋上，37℃培養(yǎng)24小時(shí)，每個(gè)平皿的菌落≤4，則認(rèn)為效果良好，否則
需延長照射時(shí)間或加強(qiáng)其它措施。半個(gè)月一次。
5、滅菌后物品放在位置，注明滅菌日期，高壓滅菌物品可存放7-14天，過期不能
再用，需重新包裝滅菌。

五、無菌室菌種管理規(guī)定
1、車間用的菌種按編碼嚴(yán)格劃分做好標(biāo)識(shí)區(qū)別擺放，與技術(shù)部的實(shí)驗(yàn)菌種分冰箱擺放。
2、車間用菌種每日傳代一次，并做好傳代記錄。
2、車間用的菌種一個(gè)月活化一次，嚴(yán)格做好標(biāo)識(shí)。
3、車間用菌種每種菌種一年做兩次甘油管冷凍保藏。
4、車間菌種每半年做一次菌種篩選，保持菌種的純正。

六、無菌室外來人員管理規(guī)定
1、外來人員進(jìn)入無菌室必須申請(qǐng)，得到公司領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn)方可進(jìn)入，進(jìn)入后必須有專人陪
同，并填寫出入記錄。
2、除本部門以外人員必須穿戴好白大褂、更換鞋，才能進(jìn)入無菌室。
3、無菌室內(nèi)無人做實(shí)驗(yàn)，必須保持門鎖閉，其他人進(jìn)入必須與無菌室保管人員申請(qǐng)。
4、除本部門以外人員在無菌室操作，必須嚴(yán)格執(zhí)行無菌室各項(xiàng)管理制度，否則接受成
長贊助每項(xiàng)5元。

七、無菌室蒸汽滅菌鍋安全使用
1、注意用電安全，鍋內(nèi)水位要在標(biāo)準(zhǔn)水位以上方可通電使用。
2、鍋內(nèi)帶滅菌物品不得超過滅菌鍋容積的2/3。
3、滅菌過程中工作人員不得長時(shí)間離開，如果因工作需要室內(nèi)有班組其他工作人員，要予以提醒，并做好看護(hù)，以防燙傷。
4、滅菌完畢后要緩慢放氣，必須在壓力表的指針回到“0”以后，放氣閥完全打開，待
鍋內(nèi)蒸氣放盡后，方可開蓋。
5、滅菌鍋的壓力表按時(shí)送檢。